CRM006 阪崎腸桿菌顯色培養基

　　(Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)

　　用 途：

　　阪崎腸桿菌顯色培養基供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計數。(GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005，ISO標準)

　　原 理：

　　蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產生;顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷與阪崎腸桿菌中的α-葡萄糖苷酶發生反應，水解底物，釋放出5-溴-4-氯-3-吲哚基顯色基團，在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。

　　阪崎腸桿菌顯色培養基配方(每升)：

　　蛋白胨 11g

　　牛肉膏粉 5g

　　氯化鈉 5g

　　檸檬酸鐵銨 　 1g

　　硫代硫酸鈉 1g

　　膽鹽 1.5g

　　5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g

　　瓊脂 15g

　　最終pH 7.3±0.2

　　使用方法:

　　1. 取瓶內干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數天(避光，4℃)。

　　2. 取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個2000ml、250ml和100ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經45℃預熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水，搖勻，在36℃培養18-22小時(SN和FDA方法)。

　　3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlEE肉湯(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中，在36℃/44℃增菌培養18-22小時。

　　4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上，35-37℃培養18-24小時。

　　5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗，對疑似阪崎腸桿菌菌落進行生化鑒定。

　　質量控制：

　　本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后36±1℃培養18-24小時生長情況如下表：

　　貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

　　規 格：可配置1L的培養基干粉。

　　參考文獻：

　　1.GB/T4789.40-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 阪崎腸桿菌檢驗

　　2.GB 4789.40-2010 中華人民共和國國家標準 食品安全國家標準 食品衛生微生物學檢驗 阪崎腸桿菌檢驗

　　3.SN/T 1632.1-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法 第1部分 分離與計數方法

　　4.SN/T 1632.2-2005 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準 奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法 第2部分 PCR方法

　　5.ISO22964-2006 Milk and milk products-----Detection of Enterobacter sakazakii